2007-7-6 1:15:14 阅读959 评论2 62007/07 July6
摘要:本文旨在介绍使用软件设计PCR 引物的技巧。在PCR 引物设计原则的基础上,详
细介绍了两种常用引物设计软件的基本使用方法,并对其各自的优缺点进行了比较。一般性
引物自动搜索可采用“Premier Primer 5”软件,而引物的评价分析则可采用“Oligo 6”软件。
关键词:PCR;引物设计
中图分类号:Q524 文献标识码: 文章编号:
自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来,PCR 技术已成为分子生物学研
2007-6-5 22:46:25 阅读713 评论0 52007/06 June5
Western Blotting实验
一 仪器与试剂
1.仪器
高速组织捣碎机: SWISS KINEMATIC Ltd. Co(型号:PT1600E)
电泳仪:北京六一仪器厂(型号:DYY-8C)
电泳槽:北京六一仪器厂(型号:DYCZ-24D)
转印槽:北京六一仪器厂(型号:DYCZ-40D)
低温高速离心机:湖南湘仪公司(型号:H2050R)
超低温冰箱:美国FORMA公司(型号:702)
分光光度计:上海分析仪器总厂(型号:721)
脱色摇床:上海琪特分析仪器有限公司(型号:STS-2)
2007-12-22 13:51:19 阅读616 评论0 222007/12 Dec22
SOD的催化使超氧自由基(O2-)被破坏,并针对氧毒性筑起了第一道防线。SOD的活性及其检测技术与许多不同领域都息息相关,如医药、生化、植物生理、食品工程等。在过去的几十年中,人们已经发现了各种各样的SOD检测方法,但是,这些方法在选择性、检测速度、价格、简便程度上都存在各自的缺陷。最近,我们发现水溶性四唑盐如XTT,WST-1,WST-8适合用于O2-的检测并且也可以被用于SOD的检测。在这些四唑盐中,WST-1灵敏度高,氧化态的吸光度低,水溶性好,因此,最适合用来做SOD检测。这种用WST-1来检测SOD的方法可以被用于鼠红血球、心脏、肝脏等生化样品中。我们还发现了一种使用了WST-1的流式注射法检测SOD的检测系统,通过这个系统能够进行快速的检测(每小时可以检测30个样品)。
2007-12-22 14:02:25 阅读336 评论0 222007/12 Dec22
1.探针的标记:
(1) 如下设置探针标记的反应体系:
待标记探针 (1.75pmol/微升) 2微升
T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X) 1微升
Nuclease-Free Water 5微升
[γ-32P]ATP(3,000Ci/mmol at 10mCi/ml) 1微升
T4 Polynucleotide Kinase (5-10u/微升) 1微升
总体积 10微升